Se realiza en quirófano con anestesia a través de una punción ovárica bajo control ecográfico. Los folículos se visualizan por ecografía, se punzan y se extraen los ovocitos que se entregan al laboratorio de embriología.
Durante esta etapa, el hombre entrega una muestra de semen al laboratorio de embriología para su procesamiento y luego se realiza la selección de espermatozoides con mejor potencial reproductivo.
También se puede practicar con espermatozoides de biopsia testicular o una muestra de semen de banco.